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荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究
Alternative TitleIsolation and Pure Culture of Holtein Milk Cow Ear Fibroblasts and Research on Cryopreservation Methods
王亮; 刘婷婷; 彭涛; 朱海; 汪汉卿; 曹旭
2006
Source Publication黑龙江畜牧兽医
ISSN1004-7034
Issue5Pages:9-12
Abstract试验对荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞的分离、体外培养及5种冷冻保存方法进行了研究.结果表明:用DMEM/F12+20%胎牛血清+100 IU/mL双抗的完全培养液进行组织块培养,能获得良好的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞原代培养物;成纤维细胞混合培养物经Trypsin-EDTA(0.25%Trypsin,1 mmol/L EDTA.4Na)消化所收集到的细胞主要为成纤维细胞,经2~3代传代,可得到纯化的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞.纯化培养的成纤维细胞在冷冻保护剂和血清成分相同的条件下,选用5种不同的冷冻保存方法进行冷冻保存,其中使用70%细胞悬液+20%胎牛血清+10%DMSO的冷冻保存悬液,先在4℃预冷平衡0.5 h,接着在液氮罐口的气态氮中悬挂4 h,然后沉入液氮的方法冻存的细胞,解冻后,经台盼蓝染色后进行细胞活力分析,活细胞率为86.68%;培养48 h后细胞贴壁率为86.40%,明显高于其他几种方法.
Keyword荷斯坦奶牛 成纤维细胞 体外培养 冷冻保存 活细胞率 细胞贴壁率
DOI10.13881/j.cnki.hljxmsy.2006.05.004
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Document Type期刊论文
Identifierhttp://ir.xjipc.cas.cn/handle/365002/4093
Collection资源化学研究室
Affiliation中国科学院兰州化学物理研究所甘肃省天然药物重点实验室;新疆金牛生物股份有限公司;中国科学院新疆理化技术研究; 中国科学院北京研究生院
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GB/T 7714
王亮,刘婷婷,彭涛,等. 荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究[J]. 黑龙江畜牧兽医,2006(5):9-12.
APA 王亮,刘婷婷,彭涛,朱海,汪汉卿,&曹旭.(2006).荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究.黑龙江畜牧兽医(5),9-12.
MLA 王亮,et al."荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究".黑龙江畜牧兽医 .5(2006):9-12.
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