XJIPC OpenIR  > 资源化学研究室
荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究
其他题名Isolation and Pure Culture of Holtein Milk Cow Ear Fibroblasts and Research on Cryopreservation Methods
王亮; 刘婷婷; 彭涛; 朱海; 汪汉卿; 曹旭
2006
发表期刊黑龙江畜牧兽医
ISSN1004-7034
期号5页码:9-12
摘要试验对荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞的分离、体外培养及5种冷冻保存方法进行了研究.结果表明:用DMEM/F12+20%胎牛血清+100 IU/mL双抗的完全培养液进行组织块培养,能获得良好的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞原代培养物;成纤维细胞混合培养物经Trypsin-EDTA(0.25%Trypsin,1 mmol/L EDTA.4Na)消化所收集到的细胞主要为成纤维细胞,经2~3代传代,可得到纯化的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞.纯化培养的成纤维细胞在冷冻保护剂和血清成分相同的条件下,选用5种不同的冷冻保存方法进行冷冻保存,其中使用70%细胞悬液+20%胎牛血清+10%DMSO的冷冻保存悬液,先在4℃预冷平衡0.5 h,接着在液氮罐口的气态氮中悬挂4 h,然后沉入液氮的方法冻存的细胞,解冻后,经台盼蓝染色后进行细胞活力分析,活细胞率为86.68%;培养48 h后细胞贴壁率为86.40%,明显高于其他几种方法.
关键词荷斯坦奶牛 成纤维细胞 体外培养 冷冻保存 活细胞率 细胞贴壁率
DOI10.13881/j.cnki.hljxmsy.2006.05.004
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文献类型期刊论文
条目标识符http://ir.xjipc.cas.cn/handle/365002/4093
专题资源化学研究室
作者单位中国科学院兰州化学物理研究所甘肃省天然药物重点实验室;新疆金牛生物股份有限公司;中国科学院新疆理化技术研究; 中国科学院北京研究生院
推荐引用方式
GB/T 7714
王亮,刘婷婷,彭涛,等. 荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究[J]. 黑龙江畜牧兽医,2006(5):9-12.
APA 王亮,刘婷婷,彭涛,朱海,汪汉卿,&曹旭.(2006).荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究.黑龙江畜牧兽医(5),9-12.
MLA 王亮,et al."荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究".黑龙江畜牧兽医 .5(2006):9-12.
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