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题名: 雪莲体细胞胚的诱导发生研究
作者: 林侃
答辩日期: 2006-06-09
导师: 王晓军、赵民安
专业: 生物有机化学
授予单位: 中国科学院研究生院
授予地点: 北京
学位: 硕士
关键词: 雪莲 ; 细胞组织培养 ; 摇瓶培养 ; 体细胞胚
摘要: 近年来,随着新疆雪莲的药用价值的不断发掘,使得盗采雪莲的现象日益严重,经本课题组相关研究人员调查发现,在雪线以下部分已很少有雪莲的踪迹,为此人工种植雪莲的需求迫在眉睫。传统的组织培养方法利用雪莲外植体获得愈伤组织,经过愈伤组织、出芽、生根、炼苗,最终形成雪莲植株,这一过程中每一个环节都需要耗费大量的人力物力,并且由于此过程中存在外界诸多环境因素的影响,导致最终的成活率较低。而利用雪莲的体细胞胚来进而得到雪莲苗,将会大大降低成本,节约人力物力的损耗。由于体胚的全能性,我们可以直接从愈伤组织获得体细胞胚,体细胞胚可以同时生根发芽,大大缩减了组织培养的环节,为大规模人工种植奠定基础。本研究旨在利用新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar. et Kir.ex Maxim)的外植体诱导形成雪莲体胚,从而为雪莲的规模化种植奠定基础。本研究中,首先利用雪莲种子萌发的新鲜植株的新鲜叶片为外植体,在MS+2,4-D 0.2 mg/L+6-BA 1.0 mg/L固体培养基诱导形成胚性愈伤,经过2-3 次继代,在MS+2,4-D 0.2 mg/L+6-BA 1.0mg/L 液体培养基诱导形成雪莲的体细胞胚,然后分别利用组织切片和利用其某些生化指标(过氧化物同工酶)的改变以及雪莲的正常生根生芽来共同鉴定雪莲的体细胞胚。同时,利用各种调节因素来促使其正常萌发。在研究过程中,我们对雪莲细胞悬浮培养中生物量以及黄酮含量变化进行跟踪监测,发现悬浮系的pH 在前期迅速下降,后期约三天后缓慢上升,5 天后又再次下降,一周以后呈较平稳态势,这对反应器培养的监测有指导作用;黄酮含量呈现类W 变化,在4-5 天左右出现最高峰,这对次生代谢物的获得非常有好处;在培养前期(1-3 天)生物量增加较快,呈现成倍增长,6 天以后趋于平稳。
内容类型: 学位论文
URI标识: http://ir.xjipc.cas.cn/handle/365002/3458
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作者单位: 中国科学院新疆理化技术研究所

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林侃. 雪莲体细胞胚的诱导发生研究[D]. 北京. 中国科学院研究生院. 2006.
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