中国科学院新疆理化技术研究所机构知识库
Advanced  
XJIPC OpenIR  > 资源化学研究室  > 期刊论文
题名: 人Ⅰ型胶原基因脂质体转染牛耳细胞克隆筛选方法
作者: 刘婷婷; 王亮; 吕自力; 彭涛; 王安江
关键词: 胶原基因 ; 转染 ; 成纤维细胞 ; 阳性克隆
刊名: 西北农业学报
发表日期: 2009
期: 4, 页:41198
资助者: 国家自然科学基金资助项目
摘要: 构建连接有人Ⅰ型胶原基因的质粒(PGC1-collagen),利用脂质体介导的方法转染荷斯坦奶牛耳成纤维细胞,优化一系列转染条件以提高转染效率,再利用G418和GFP荧光的表达来筛选稳定转染的细胞,最后以未转染的成纤维细胞作为阴性对照组,PGC1-collagen作为阳性对照组对转染的细胞进行PCR验证。结果显示:在6孔培养板中细胞融合度达到50%~60%左右介导1~3μg重组质粒转染24 h,转染效率可达25%~30%,筛选单克隆细胞在荧光显微镜观察检测到绿色荧光蛋白的表达。在使用800 U的G418筛选效果最好,维持浓度300~600 U,获得25个稳定表达的阳性细胞系,从中选取6个克隆进行PCR验证。成功利用脂质体转染方法将人Ⅰ型胶原基因成功转染到荷斯坦奶牛耳成纤维细胞,PCR验证结果正确。
内容类型: 期刊论文
URI标识: http://ir.xjipc.cas.cn/handle/365002/1790
Appears in Collections:资源化学研究室_期刊论文

Files in This Item:
File Name/ File Size Content Type Version Access License
人Ⅰ型胶原基因脂质体转染牛耳细胞克隆筛选方法.pdf(394KB)期刊论文作者接受稿开放获取View 联系获取全文

作者单位: 新疆金牛生物有限公司;中国科学院新疆理化技术研究所

Recommended Citation:
刘婷婷,王亮,吕自力,等. 人Ⅰ型胶原基因脂质体转染牛耳细胞克隆筛选方法[J]. 西北农业学报,2009(4):41198.
Service
Recommend this item
Sava as my favorate item
Show this item's statistics
Export Endnote File
Google Scholar
Similar articles in Google Scholar
[刘婷婷]'s Articles
[王亮]'s Articles
[吕自力]'s Articles
CSDL cross search
Similar articles in CSDL Cross Search
[刘婷婷]‘s Articles
[王亮]‘s Articles
[吕自力]‘s Articles
Related Copyright Policies
Null
Social Bookmarking
Add to CiteULike Add to Connotea Add to Del.icio.us Add to Digg Add to Reddit
文件名: 人Ⅰ型胶原基因脂质体转染牛耳细胞克隆筛选方法.pdf
格式: Adobe PDF
所有评论 (0)
暂无评论
 
评注功能仅针对注册用户开放,请您登录
您对该条目有什么异议,请填写以下表单,管理员会尽快联系您。
内 容:
Email:  *
单位:
验证码:   刷新
您在IR的使用过程中有什么好的想法或者建议可以反馈给我们。
标 题:
 *
内 容:
Email:  *
验证码:   刷新

Items in IR are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.

 

 

Valid XHTML 1.0!
Powered by CSpace